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首頁 > 核酸生物學 > 核酸電泳 > 雙鏈DNA Marker

1kb DNA ladder(1000-10000bp)

1kb DNA ladder(1000-10000bp)

產品編號:RTM417-02

產品規(guī)格:100次

相關規(guī)格:
數量
價格 ¥150

精準定量1kb DNA Ladder

● 產品編號及規(guī)格:

    RTM417-02       100T(2×250μl)

● 產品簡介:

    本產品是由8條帶狀雙鏈DNA條帶組成,適用于瓊脂糖凝膠電泳中DNA條帶的分析。

本產品為即用型產品,已含有1×loading buffer,可根據實驗需要,直接取2-5μl電泳,使用方便,電泳圖像清晰。本產品中8條帶分為1000(50 ng/5 μl),2000(50 ng/5 μl),3000(50 ng/5 μl),4000(100 ng/5 μl),5000(50 ng/5 μl),6000(50 ng/5 μl),8000(50 ng/5 μl),10000bp(50 ng/5 μl)。其中4000bp條帶加亮顯示。


● 儲存及運輸:

4貯存3個月, -20長期貯存;常溫運輸。

● 使用方法:

1. 取2-5μl本產品加入到瓊脂糖凝膠的加樣孔中(每1mm×1mm加樣孔加1μl,如果加樣孔寬于5mm,可以適當增加上樣量)就行電泳。

2. 建議電泳條件:凝膠濃度為0.8-1.0%,凝膠長度10 cm,電泳電壓~7v/cm,電泳時間60+分鐘。

3. 通過核酸染料染色后紫外燈或藍光儀下觀察條帶。


● 注意事項:

1. 瓊脂糖的質量對DNA的電泳有很大影響,電泳時請盡量使用質量優(yōu)等的瓊脂糖。由于PAGE電泳的特殊性,該產品不建議用于PAGE電泳。

2. 使用與電泳緩沖液一致的緩沖液融化瓊脂糖,例如使用1×TAE緩沖液電泳,需使用1×TAE緩沖液溶膠。

3. 多次電泳后緩沖液電導增強,相同電壓下電流增大,導致分辨率降低,并且明顯產熱,嚴重時會引起凝膠熔化或DNA變性。

4. 推薦使用RealSafe系列染料(貨號:GR002,GR003,GR004)染色。如果使用Goldview或EB等染料進行染色,由于此類染料帶更多的正電荷(染料移動方向與核酸泳動方向相反),隨著電泳時間延長,染料向大片段聚集,凝膠會出現陰陽膠現象(染料含量高的凝膠紫外下較亮,含量低的凝膠紫外下發(fā)暗),導致小分子量DNA顯色很弱或不可見。陰陽膠可以在電泳結束后浸泡染色,將膠浸沒在含1 μg /ml EB或Goldview的電泳緩沖液中20-25 min,小分子量DNA會顯色清楚。更長時間浸泡會因DNA分子擴散而使條帶彌散,小分子量DNA更易彌散。

5. 紫外照射下EB易分解,使DNA條帶熒光變淺。DNA受紫外光照射形成嘧啶二聚體,不利于待回收片段的下游工作,因此盡可能減少紫外照射時間。

6. 蔗糖會結合DNA,降低其電泳遷移率,建議DNA樣品上樣使用含甘油的Loading Buffer。

7. 大部分核酸工具酶會結合DNA,降低其電泳遷移率,大分子量DNA尤為明顯。

● 實驗示例:


● 附錄:

DNA在瓊脂糖凝膠中的有效分離范圍

瓊脂糖濃度%w/v

雙鏈DNA有效分離范圍(bp

優(yōu)選電泳緩沖液

示蹤染料相當于雙鏈DNA片段粗略大小(bp)

溴酚藍

二甲苯菁

TBE

TAE

TBE

TAE

0.5

2000-50000

1×TAE

750

1150

13000

16700

0.8

800-10000

1×TAE

320

530

4830

6500

1.0

400-8000

1×TAE

220

370

3030

4160

1.2

300-7000

1×TAE/0.5×TBE

160

275

2070

2890

1.5

200-3000

1×TAE/0.5×TBE

110

190

1300

1840

2.0

100-2000

0.5×TBE

65

120

710

1040

3.0

25-1000

0.5×TBE

30

60

300

460

 

 


使用RTM417  1kb DNA ladder產品發(fā)表部分文章列表:

1. [2023 IF=4.9] Degradation of Natural Undaria pinnatifida into Unsaturated Guluronic Acid Oligosaccharides by a Single Alginate Lyase.

Marker :RTM417,1kb DNA ladder

Author: Hui Wang, Jiaqi Wen, Nuraliya Ablimit, Kun Deng, Wenzhuo Wang and Wei Jiang

Journal: Marine Drugs 2024, 22,453.

InstitutionCollege of Biological Sciences, China Agricultural University

Paper linkhttps://doi.org/10.3390/md22100453


 
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